Dipartimento di Medicina di Laboratorio, Ospedale del Popolo della Regione Autonoma di Guangxi Zhuang, Nanning, Cina
Dipartimento di Medicina di Laboratorio, Ospedale Affiliato dell'Università di Medicina Tradizionale Cinese di Shandong, Jinan
Huang Huayi, School of Laboratory Medicine, Youjiang National Medical University, Baise, Guangxi, 533000, Mindray North America, Mahwah, New Jersey, 07430, USA.
Dipartimento di Medicina di Laboratorio, Ospedale del Popolo della Regione Autonoma di Guangxi Zhuang, Nanning, Cina
Dipartimento di Medicina di Laboratorio, Ospedale Affiliato dell'Università di Medicina Tradizionale Cinese di Shandong, Jinan
Huang Huayi, School of Laboratory Medicine, Youjiang National Medical University, Baise, Guangxi, 533000, Mindray North America, Mahwah, New Jersey, 07430, USA.
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Al fine di comprendere meglio i cambiamenti patologici di COVID-19, è favorevole alla gestione clinica della malattia e alla preparazione per l'ondata di pandemie simili in futuro.
I parametri ematologici di 52 pazienti COVID-19 ricoverati negli ospedali designati sono stati analizzati retrospettivamente.I dati sono stati analizzati utilizzando il software statistico SPSS.
Prima del trattamento, i sottogruppi di cellule T, i linfociti totali, la larghezza di distribuzione dei globuli rossi (RDW), gli eosinofili e i basofili erano significativamente inferiori rispetto a dopo il trattamento, mentre gli indicatori di infiammazione di neutrofili, neutrofili e linfociti Il rapporto (NLR) e la proteina C β-reattiva ( I livelli di PCR), così come i globuli rossi (RBC) e l'emoglobina sono diminuiti significativamente dopo il trattamento.I sottogruppi di cellule T, linfociti totali e basofili dei pazienti gravi e in condizioni critiche erano significativamente inferiori a quelli dei pazienti moderati.Neutrofili, NLR, eosinofili, procalcitonina (PCT) e CRP sono significativamente più elevati nei pazienti gravi e in condizioni critiche rispetto ai pazienti moderati.I CD3+, CD8+, linfociti totali, piastrine e basofili dei pazienti di età superiore a 50 anni sono inferiori a quelli di età inferiore a 50 anni, mentre i neutrofili, NLR, CRP, RDW nei pazienti di età superiore a 50 anni sono superiori a quelli di età inferiore a 50 anni.Nei pazienti gravi e in condizioni critiche, esiste una correlazione positiva tra tempo di protrombina (PT), alanina aminotransferasi (ALT) e aspartato aminotransferasi (AST).
I sottogruppi di cellule T, la conta dei linfociti, RDW, neutrofili, eosinofili, NLR, CRP, PT, ALT e AST sono indicatori importanti nella gestione, soprattutto per i pazienti gravi e critici con COVID-19.
La pandemia di Coronavirus (COVID-19) del 2019 causata da un nuovo tipo di coronavirus è scoppiata a dicembre 2019 e si è diffusa rapidamente in tutto il mondo.1-3 All'inizio dell'epidemia, l'attenzione clinica era rivolta alle manifestazioni e all'epidemiologia, combinate con la tomografia computerizzata per visualizzare i pazienti 4 e 5, e quindi diagnosticare risultati positivi di amplificazione nucleotidica.Tuttavia, varie lesioni patologiche sono state successivamente riscontrate in diversi organi.6-9 Sempre più evidenze mostrano che i cambiamenti fisiopatologici del COVID-19 sono più complicati.L'attacco del virus provoca danni multipli agli organi e il sistema immunitario reagisce in modo eccessivo.Sono stati osservati aumenti delle citochine sieriche e alveolari e delle proteine della risposta infiammatoria7, 10-12, e in pazienti critici sono stati riscontrati linfopenia e sottogruppi di cellule T anormali.13, 14 È riportato che il rapporto tra neutrofili e linfociti è diventato un indicatore utile per distinguere i noduli tiroidei maligni e benigni nella pratica clinica.15 NLR può anche aiutare a distinguere i pazienti con colite ulcerosa dai controlli sani.16 Svolge anche un ruolo nella tiroidite ed è associato al diabete di tipo 2.17, 18 RDW è un marker di eritrocitosi.Gli studi hanno scoperto che aiuta a distinguere i noduli tiroidei, diagnosticare l'artrite reumatoide, la malattia del disco lombare e la tiroidite.19-21 CRP è un predittore universale di infiammazione ed è stato studiato in molti casi.22 È stato recentemente scoperto che anche NLR, RDW e CRP sono coinvolti nel COVID-19 e svolgono un ruolo importante nella diagnosi e nella prognosi della malattia.11, 14, 23-25 Pertanto, i risultati degli esami di laboratorio sono importanti per valutare le condizioni del paziente e prendere decisioni terapeutiche.Abbiamo analizzato retrospettivamente i parametri di laboratorio di 52 pazienti COVID-19 che sono stati ricoverati in ospedali designati nel sud della Cina in base al loro pre e post-trattamento, gravità ed età, per comprendere ulteriormente i cambiamenti patologici della malattia e aiutare la futura gestione clinica di COVID-19.
Questo studio ha condotto un'analisi retrospettiva di 52 pazienti COVID-19 ricoverati presso l'ospedale designato Nanning Fourth Hospital dal 24 gennaio 2020 al 2 marzo 2020. Tra questi, 45 erano moderatamente malati e 5 gravemente.Ad esempio, l'età varia da 3 mesi a 85 anni.In termini di genere, c'erano 27 maschi e 25 femmine.Il paziente presenta sintomi quali febbre, tosse secca, affaticamento, mal di testa, mancanza di respiro, congestione nasale, naso che cola, mal di gola, dolori muscolari, diarrea e mialgia.La tomografia computerizzata ha mostrato che i polmoni erano irregolari o di vetro smerigliato, indicando una polmonite.Diagnosticare secondo la 7a edizione delle linee guida cinesi per la diagnosi e il trattamento del COVID-19.Confermato dal rilevamento qPCR in tempo reale dei nucleotidi virali.Secondo i criteri diagnostici, i pazienti sono stati divisi in gruppi moderati, gravi e critici.In casi moderati, il paziente sviluppa febbre e sindrome respiratoria e i risultati dell'imaging mostrano schemi di polmonite.Se il paziente soddisfa uno qualsiasi dei seguenti criteri, la diagnosi è grave: (a) distress respiratorio (frequenza respiratoria ≥30 respiri/min);(b) saturazione di ossigeno nel sangue delle dita a riposo ≤93%;(c) pressione arteriosa dell'ossigeno (PO2) )/frazione inspiratoria O2 (Fi O2) ≤300 mm Hg (1 mm Hg = 0,133 kPa).Se il paziente soddisfa uno qualsiasi dei seguenti criteri, la diagnosi è grave: (a) insufficienza respiratoria che richiede ventilazione meccanica;(b) shock;(c) altra insufficienza d'organo che richiede un trattamento nell'unità di terapia intensiva (ICU).Secondo i criteri di cui sopra, 52 pazienti sono stati diagnosticati come gravemente malati in 2 casi, gravemente malati in 5 casi e moderatamente malati in 45 casi.
Tutti i pazienti, compresi quelli moderati, gravi e in condizioni critiche, sono trattati secondo le seguenti procedure di base: (a) terapia adiuvante generale;(b) Terapia antivirale: lopinavir/ritonavir e α-interferone;(c) Il dosaggio della formula della medicina tradizionale cinese può essere regolato in base alle condizioni del paziente.
Questo studio è stato approvato dal Comitato di Revisione dell'Istituto di Ricerca del Quarto Ospedale di Nanning ed è stato utilizzato per raccogliere informazioni sui pazienti.
Analisi ematologica del sangue periferico: l'analisi ematologica di routine del sangue periferico viene eseguita sull'analizzatore ematologico Mindray BC-6900 (Mindray) e sull'analizzatore ematologico Sysmex XN 9000 (Sysmex).Il campione di sangue anticoagulante a base di acido etilendiamminotetraacetico (EDTA) a digiuno è stato raccolto la mattina dopo il ricovero del paziente in ospedale.La valutazione di coerenza tra i due emoanalizzatori di cui sopra è stata verificata secondo le procedure di controllo qualità di laboratorio.Nell'analisi ematologia, il conteggio e la differenziazione dei globuli bianchi (WBC), i globuli rossi (RBC) e l'indice sono ottenuti insieme ai grafici a dispersione e agli istogrammi.
Citometria a flusso delle sottopopolazioni di linfociti T: il citometro a flusso FACSCalibur BD (Becton, Dickinson and Company) è stato utilizzato per l'analisi della citometria a flusso per analizzare le sottopopolazioni di cellule T.Analizzare i dati tramite il software MultiSET.La misurazione è stata eseguita secondo le procedure operative standard e le istruzioni del produttore.Utilizzare una provetta per la raccolta del sangue anticoagulato con EDTA per raccogliere 2 ml di sangue venoso.Mescolare delicatamente il campione girando più volte la provetta per evitare la condensa.Dopo che il campione è stato raccolto, viene inviato al laboratorio e analizzato entro 6 ore a temperatura ambiente.
Analisi dell'immunofluorescenza: la proteina C-reattiva (CRP) e la procalcitonina (PCT) sono state analizzate immediatamente dopo il completamento dell'analisi utilizzando campioni di sangue analizzati dall'ematologia e analizzati sull'analizzatore di immunofluorescenza FS-112 (Wondfo Biotech Co., LTD.) su le analisi.) Seguire le istruzioni del produttore e gli standard delle procedure di laboratorio.
Analizzare l'alanina aminotransferasi (ALT) e l'aspartato aminotransferasi (AST) sull'analizzatore chimico HITACHI LABOSPECT008AS (HITACHI).Il tempo di protrombina (PT) è stato analizzato sull'analizzatore STAGO STA-R Evolution (Diagnostica Stago).
Reazione a catena della polimerasi quantitativa di trascrizione inversa (RT-qPCR): utilizzare modelli di RNA isolati da tamponi nasofaringei o secrezioni del tratto respiratorio inferiore per eseguire RT-qPCR per rilevare SARS-CoV-2.Gli acidi nucleici sono stati separati sulla piattaforma di separazione automatica degli acidi nucleici SSNP-2000A (Bioperfectus Technologies).Il kit di rilevamento è stato fornito dalla Sun Yat-sen University Daan Gene Co., Ltd. e Shanghai BioGerm Medical Biotechnology Co., Ltd. Il ciclo termico è stato eseguito su un termociclatore ABI 7500 (Applied Biosystems).I risultati del test dei nucleosidi virali sono definiti come positivi o negativi.
Per l'analisi dei dati è stato utilizzato il software SPSS versione 18.0;Sono stati applicati il test t per campioni appaiati, il test t per campioni indipendenti o il test U di Mann-Whitney e un valore P <.05 è stato considerato significativo.
Cinque pazienti in condizioni critiche e due pazienti in condizioni critiche erano più anziani di quelli nel gruppo moderato (69,3 vs 40,4).Le informazioni dettagliate di 5 pazienti in condizioni critiche e 2 pazienti in condizioni critiche sono mostrate nelle Tabelle 1A e B. I pazienti gravi e in condizioni critiche sono generalmente bassi nei sottogruppi di cellule T e nella conta totale dei linfociti, ma la conta dei globuli bianchi è più o meno normale, ad eccezione dei pazienti con globuli bianchi elevati (11,5 × 109/L).Anche i neutrofili e i monociti sono generalmente elevati.I valori sierici di PCT, ALT, AST e PT di 2 pazienti in condizioni critiche e 1 paziente in condizioni critiche erano elevati e i valori di PT, ALT, AST di 1 paziente in condizioni critiche e 2 pazienti in condizioni critiche erano correlati positivamente.Quasi tutti i 7 pazienti avevano livelli elevati di PCR.Gli eosinofili (EOS) e i basofili (BASO) tendono ad essere bassi nei pazienti critici e in condizioni critiche (Tabella 1A e B).La tabella 1 elenca la descrizione dell'intervallo normale dei parametri ematologici nella popolazione adulta cinese.
L'analisi statistica ha mostrato che prima del trattamento, cellule T CD3+, CD4+, CD8+, linfociti totali, larghezza di distribuzione dei globuli rossi (RDW), eosinofili e basofili erano significativamente inferiori rispetto a dopo il trattamento (P = .000,. 000, .000, .012, . 04, .000 e .001).Gli indicatori infiammatori neutrofili, rapporto neutrofili/linfociti (NLR) e PCR prima del trattamento erano significativamente più alti rispetto a dopo il trattamento (P = .004, .011 e .017, rispettivamente).Hb e globuli rossi sono diminuiti significativamente dopo il trattamento (P = .032, .026).Il PLT è aumentato dopo il trattamento, ma non era significativo (P = .183) (Tabella 2).
I sottogruppi di cellule T (CD3+, CD4+, CD8+), linfociti totali e basofili dei pazienti gravi e critici erano significativamente inferiori a quelli dei pazienti moderati (P = .025, 0.048, 0.027, 0.006 e .046).I livelli di neutrofili, NLR, PCT e CRP nei pazienti gravi e in condizioni critiche erano significativamente superiori a quelli dei pazienti moderati (P = .005, .002, .049 e .002, rispettivamente).I pazienti gravi e in condizioni critiche avevano un PLT inferiore rispetto ai pazienti moderati;tuttavia, la differenza non era statisticamente significativa (Tabella 3).
I CD3+, CD8+, linfociti totali, piastrine e basofili dei pazienti di età superiore a 50 anni erano significativamente inferiori a quelli dei pazienti di età inferiore a 50 anni (P = .049, 0.018, 0.019, 0.010 e .039, rispettivamente), mentre quelli di età superiore a 50 anni I neutrofili dei pazienti, il rapporto NLR, i livelli di PCR e RDW erano significativamente superiori a quelli dei pazienti di età inferiore a 50 anni (P = .0191, 0.015, 0.009 e .010, rispettivamente) (Tabella 4).
COVID-19 è causato dall'infezione con il coronavirus SARS-CoV-2, apparso per la prima volta a Wuhan, in Cina, nel dicembre 2019. L'epidemia di SARS-CoV-2 si è diffusa rapidamente in seguito e ha portato a una pandemia globale.1-3 A causa della limitata conoscenza dell'epidemiologia e della patologia del virus, il tasso di mortalità all'inizio dell'epidemia è elevato.Sebbene non ci siano farmaci antivirali, la gestione e il trattamento del follow-up del COVID-19 sono stati notevolmente migliorati.Ciò è particolarmente vero in Cina quando le terapie adiuvanti sono combinate con la medicina tradizionale cinese per trattare i casi precoci e moderati.26 pazienti COVID-19 hanno beneficiato di una migliore comprensione dei cambiamenti patologici e dei parametri di laboratorio della malattia.patologia.Da allora, il tasso di mortalità è diminuito.In questo rapporto, non ci sono stati decessi tra i 52 casi analizzati, inclusi 7 pazienti gravi e in condizioni critiche (Tabella 1A e B).
Le osservazioni cliniche hanno scoperto che la maggior parte dei pazienti con COVID-19 ha linfociti ridotti e sottopopolazioni di cellule T, che sono correlate alla gravità della malattia.13, 27 In questo rapporto, è stato riscontrato che i linfociti T CD3+, CD4+, CD8+, linfociti totali, RDW prima del trattamento, eosinofili e basofili erano significativamente inferiori rispetto a dopo il trattamento (P = .000, .000, .000, .012, .04, .000 e .001).I nostri risultati sono simili ai rapporti precedenti.Questi rapporti hanno un significato clinico nel monitoraggio della gravità di COVID-19.8, 13, 23-25, 27, mentre gli indicatori infiammatori neutrofili, rapporto neutrofili/linfociti (NLR) e CRP dopo il pre-trattamento rispetto al trattamento (P = .004, .004, . 011 e .017, rispettivamente), che sono stati notati e segnalati in precedenza in pazienti COVID-19.Pertanto, questi parametri sono considerati indicatori utili per il trattamento del COVID-19.8.Dopo il trattamento, 11 emoglobina e globuli rossi erano significativamente ridotti (P = .032, 0.026), indicando che il paziente aveva anemia durante il trattamento.Dopo il trattamento è stato osservato un aumento del PLT, ma non significativo (P = .183) (Tabella 2).Si ritiene che la diminuzione dei linfociti e delle sottopopolazioni di cellule T sia correlata all'esaurimento e all'apoptosi cellulare quando si accumulano nei siti infiammatori che combattono il virus.Oppure potrebbero essere stati consumati da un'eccessiva secrezione di citochine e proteine infiammatorie.8, 14, 27-30 Se i sottogruppi di linfociti e cellule T sono persistentemente bassi e il rapporto CD4+/CD8+ è alto, la prognosi è sfavorevole.29 Nella nostra osservazione, i linfociti e i sottogruppi di cellule T si sono ripresi dopo il trattamento e tutti i 52 casi sono stati curati (Tabella 1).Elevati livelli di neutrofili, NLR e CRP sono stati osservati prima del trattamento, per poi diminuire significativamente dopo il trattamento (P = .004, .011 e .017, rispettivamente) (Tabella 2).La funzione dei sottoinsiemi di cellule T nell'infezione e nella risposta immunitaria è stata precedentemente segnalata.29, 31-34
Poiché il numero di pazienti gravi e critici è troppo piccolo, non abbiamo eseguito analisi statistiche sui parametri tra pazienti gravi e critici e pazienti moderati.I sottogruppi di cellule T (CD3+, CD4+, CD8+) e i linfociti totali dei pazienti gravi e critici sono significativamente inferiori a quelli dei pazienti moderati.I livelli di neutrofili, NLR, PCT e CRP nei pazienti gravi e in condizioni critiche erano significativamente superiori a quelli dei pazienti moderati (P = .005, .002, .049 e .002, rispettivamente) (Tabella 3).Le modifiche ai parametri di laboratorio sono correlate alla gravità di COVID-19.35.36 La causa della basofilia non è chiara;ciò può essere dovuto al consumo di cibo mentre si combatte il virus nel sito di infezione simile ai linfociti.35 Lo studio ha rilevato che i pazienti con COVID-19 grave avevano anche eosinofili ridotti;14 Tuttavia, i nostri dati non hanno mostrato che questo fenomeno possa essere dovuto al piccolo numero di casi gravi e critici osservati nello studio.
È interessante notare che abbiamo scoperto che nei pazienti gravi e in condizioni critiche esiste una correlazione positiva tra i valori di PT, ALT e AST, indicando che nell'attacco del virus si sono verificati danni multipli d'organo, come menzionato in altre osservazioni.37 Pertanto, possono essere nuovi parametri utili per valutare la risposta e la prognosi del trattamento del COVID-19.
Ulteriori analisi hanno mostrato che CD3+, CD8+, linfociti totali, piastrine e basofili dei pazienti di età superiore ai 50 anni erano significativamente inferiori a quelli dei pazienti di età inferiore ai 50 anni (P = P = .049, .018, .019, .010 e. 039, rispettivamente), mentre i livelli di neutrofili, NLR, CRP e RBC RDW nei pazienti di età superiore ai 50 anni erano significativamente superiori a quelli dei pazienti di età inferiore a 50 anni (P = .0191, 0.015, 0.009 e .010 , rispettivamente) (Tabella 4) .Questi risultati sono simili ai rapporti precedenti.14, 28, 29, 38-41 La diminuzione delle sottopopolazioni di cellule T e gli alti rapporti di cellule T CD4+/CD8+ sono correlati alla gravità della malattia;i casi anziani tendono ad essere più gravi;pertanto, più linfociti verranno consumati nella risposta immunitaria o gravemente danneggiati.Allo stesso modo, un RDW RBC più alto indica che questi pazienti hanno sviluppato anemia.
I risultati della nostra ricerca confermano ulteriormente che i parametri ematologici sono di grande importanza per una migliore comprensione dei cambiamenti clinicopatologici dei pazienti COVID-19 e per migliorare la guida del trattamento e della prognosi.
Liang Juanying e Nong Shaoyun hanno raccolto dati e informazioni cliniche;Jiang Liejun e Chi Xiaowei hanno eseguito l'analisi dei dati;Dewu Bi, Jun Cao, Lida Mo e Xiaolu Luo hanno eseguito analisi di routine;Huang Huayi era responsabile dell'ideazione e della scrittura.
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Tempo di pubblicazione: 22-luglio-2021